Температурная инактивация биферментной системы светящихся бактерий NADH:FMN-оксидоредуктаза-люцифераза в желатине

Abstract

Исследовано влияние желатинового раствора и геля на биолюминесценцию биферментной системы светящихся бактерий NADH:FMN-оксидоредуктаза-люцифераза, изучены термостабильность и температурная инактивация биферментной системы в желатиновом окружении. Активность биферментной системы и кинетика её термоинактивации в желатине низкой концентрации, недостаточной для формирования геля, и в желатине высокой концентрации, способной к образованию геля, различаются. Установлено, что термоинактивация биферментной системы имеет нелинейный характер и происходит по диссоциативному механизму. Гелевая матрица желатина оказывает на ферменты стабилизирующее действие. Помещение ферментов в вязкую среду, созданную гелевым окружением желатина, не влияет на скорость ферментативных реакций.

Influence of gelatin solution and gel on bioluminescence of coupled enzymatic system of luminous bacteria NADH:FMN-oxidoreductase-luciferase was analyzed, thermostability and thermoinactivation of coupled enzyme system in gelatinous environment were studied. Activity of coupled enzyme system and kinetics of its thermoinactivation in gelatin with low concentration, that is insufficient for gel formation, and in gelatin with high concentration, that is sufficient for gel formation, was different. It was determined that thermoinactivation of coupled enzyme system has nonlinear nature and occurs with dissociative mechanism. It was showed that gel matrix of gelatin stabilizes enzymes. There was no effect of viscous environment originating by gelatin surroundings on the rate of enzymatic reactions.