Design of Aptamer Sandwich Pairs for Colorimetric Detection of TNFa, Interleukin-17A and Dickkopf-1 Proteins Associated with Ankylosing Spondylitis

Abstract

We employed DNA and 2’-fluoro RNA aptamers to assembly novel systems for colorimetric microplate detection of TNFa, interleukin-17A and Dickkopf-1 proteins as biomarkers associated with ankylosing spondylitis. For each protein, we chose an optimal sandwich pair made of plate-immobilized capture aptamer and biotinylated reporter aptamer recruiting streptavidin-peroxidase conjugate. A feasibility of these test systems was demonstrated in model protein solutions

На основе ДНК- и 2’-фтор-РНК-аптамеров сконструированы новые системы колориметрической микропланшетной детекции белковых биомаркеров ФНОа, интерлейкина-17А, Dickkopf-1, ассоциированных с анкилозирующим спондилитом. Для каждого белка выбрана оптимальная сэндвич-пара иммобилизованного на планшете улавливающего аптамера и биотинилированного репортерного аптамера, который взаимодействует с конъюгатом стрептавидин-щелочная фосфатаза. Показана принципиальная работоспособность таких тест-систем в модельных растворах белка