Determination of Free Proteinogenic Amino Acids in Soil Solutions by HPLC with Phenyl Isothiocyanate Derivatization

Abstract

A high-performance liquid chromatography method for the determination of seventeen free proteinogenic amino acids (FPAA) in soil solutions is described. Sample preparation involves obtaining soil solution and pre-column derivatization of free amino acids using phenyl isothiocyanate. Phenyl thiocarbamyl derivatives are separated on a reversed-phase column by using linear gradient elution with 140 mM sodium acetate buffer solution (pH 6.0) contained 0.05% triethylamine as mobile phase A and acetonitrile-water (60:40,v/v) as mobile phase B. The described method showed adequate linearity, recovery values, limits of detection, and suitable for the determination of FPAA in soil solutions

Описан способ определения семнадцати свободных протеиногенных аминокислот почвенного раствора методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Пробоподготовка включает в себя получение почвенного раствора и предколоночную дериватизацию свободных аминокислот фенилизотиоцианатом. Хроматографическое разделение производных аминокислот проводили на обратнофазной колонке в линейном градиенте при использовании системы, состоящей из буфера, приготовленного добавлением 0,5 мл/л триэтиламина к 0,14 М ацетату натрия (pH 6,0) и смеси ацетонитрил-вода (60:40). Описанный способ имеет удовлетворительные аналитические характеристики и приемлем для определения концентраций свободных протеиногенных аминокислот в почвенном растворе