Development of 3D Glioma Models Based on Cell Spheroids Embedded in Pectin- Collagen Matrix

Abstract

Three-dimensional cell culture is a modern tool for cancer research. This cell-based model combines the simplicity and accessibility of two-dimensional systems with mimicking in vivo conditions via supporting cell- cell and cell-matrix interactions. This allows it to be used both for studying the mechanisms of cancerogenesis and for preclinical testing anticancer therapeutics. In this research, we propose a simple and detailed technique for the preparation of spheroids composed of human glioblastoma cells embedded in a biopolymer matrix based on modified pectins supplemented with collagen I. The protocol also includes long-term cell monitoring with comprehensive analysis of cell viability, migration and behavior in culture using conventional optical imaging, laser scanning microscopy and flow cytometry

Трехмерная клеточная культура – современный инструмент для исследования злокачественных новообразований. Такие клеточные модели сочетают в себе простоту и доступность двумерных систем с имитацией условий in vivo благодаря воссозданию взаимодействий клетка-клетка и клетка-матрикс. Это позволяет использовать их как для изучения механизмов канцерогенеза, так и для доклинического тестирования противоопухолевых терапевтических средств. В этом исследовании мы предлагаем простую методику приготовления сфероидов из клеток глиобластомы человека, встроенных в биополимерный матрикс на основе модифицированных пектинов, с добавлением коллагена I. Протокол также включает длительный мониторинг клеток с комплексным анализом жизнеспособности, миграции и поведения клеток в культуре с использованием традиционной оптической визуализации, лазерной сканирующей микроскопии и проточной цитометрии