Bioluminescent monitoring enables observation of intracellular events in real time without cell and tissue destruction
URI (для ссылок/цитирований):
https://elibrary.ru/item.asp?id=29107902https://elib.sfu-kras.ru/handle/2311/69559
Автор:
Маркова, Светлана Владимировна
Маликова, Наталья Петровна
Высоцкий, Евгений Степанович
Франк, Людмила Алексеевна
Гительзон, Иосиф Исаевич
Коллективный автор:
Институт фундаментальной биологии и биотехнологии
Базовая кафедра биотехнологии
Дата:
2017-05Журнал:
BiophysicsКвартиль журнала в Scopus:
Q4Библиографическое описание:
Маркова, Светлана Владимировна. Bioluminescent monitoring enables observation of intracellular events in real time without cell and tissue destruction [Текст] / Светлана Владимировна Маркова, Наталья Петровна Маликова, Евгений Степанович Высоцкий, Людмила Алексеевна Франк, Иосиф Исаевич Гительзон // Biophysics. — 2017. — Т. 62 (№ 3). — С. 618-624Текст статьи не публикуется в открытом доступе в соответствии с политикой журнала.
Аннотация:
Секретируемые репортеры обеспечивают мониторинг внутриклеточных событий в реальном времени без разрушения клеток. Для создания клеточных линий меланомы человека с возможностью неинвазивного биолюминесцентного мониторинга метаболической активности проведено сравнение эффективности изоформ и мутантных вариантов люциферазы из Metridia longa в качестве секретируемых репортеров в клетках линии меланомы человека Mel IL. Из исследованных двух изоформ и двух делеционных мутантов секретируемой люциферазы M. longa при трансфекции клеток меланомы Mel IL наибольшую активность в среде обнаружил делеционный мутант MLM3. Установлено, что оптимизация структуры гена выбранного варианта MLM3 для экспрессии в клетках человека еще почти на порядок увеличивает уровень биолюминесцентной активности в клетках Mel IL. Стабильная клеточная линия меланомы Mel IL с конститутивной экспрессией гуманизированного репортера hMLM3 получена и охарактеризована. Линейный диапазон идентификации живых клеток по активности hMLM3 репортера составлял более трех порядков с чувствительностью детекции, достигающей 10 клеток.