Показать сокращенную информацию
Using of pyrosequencing method for the detection and quantitative determination of mutant JAK2 Exon 12 Allele Burden
Автор | Субботина, Т. Н. | |
Автор | Дунаева, Е. А. | |
Автор | Миронов, К. О. | |
Автор | Дрибноходова, О. П. | |
Автор | Харсекина, А. Е. | |
Автор | Васильев, Е. В. | |
Автор | Хоржевский, В. А. | |
Автор | Ольховский, И. А. | |
Автор | Шипулин, Г. А. | |
Дата внесения | 2018-02-07T07:26:36Z | |
Дата, когда ресурс стал доступен | 2018-02-07T07:26:36Z | |
Дата публикации | 2016-12 | |
Библиографическое описание | Субботина, Т. Н. Using of pyrosequencing method for the detection and quantitative determination of mutant JAK2 Exon 12 Allele Burden [Текст] / Т. Н. Субботина, Е. А. Дунаева, К. О. Миронов, О. П. Дрибноходова, А. Е. Харсекина, Е. В. Васильев, В. А. Хоржевский, И. А. Ольховский, Г. А. Шипулин // Gematologiya i Transfuziologiya. — 2016. — Т. 61 (№ 4). — С. 196-200 | |
ISSN | 02345730 | |
URI (для ссылок/цитирований) | http://www.medlit.ru/journalsview/haemathology/%d0%b0%d1%80%d1%85%d0%b8%d0%b2/ | |
URI (для ссылок/цитирований) | https://elib.sfu-kras.ru/handle/2311/69645 | |
Аннотация | Соматические мутации в кодонах 532-547 12-го экзона гена JAK2 высокоспецифичны для подтверждения диагноза истинной полицитемии. Цель настоящей работы - разработка методики для обнаружения и количественной оценки уровня аллельной нагрузки данных мутаций с использованием технологии пиросеквенирования. Определение нуклеотидной последовательности проводили на приборе PyroMark Q24. Для верификации наличия мутаций выполняли клонирование ДНК, выделенной из клинических образцов. Секвенирование клонов проводили с использованием реагентов и оборудования фирмы "Applied Bbsystems" (США). После подтверждения наличия мутации в клонах методом Сэнгера, образец, содержащий мутацию, повторно анализировали на приборе PyroMarkQ24 в количественном формате для определения уровня аллельной нагрузки. Среди 48 образцов ДНК от пациентов с высокой клинико-гематологической вероятностью диагноза истинной полицитемии и отсутствием мутации V617F в 14-м экзоне гена JAK2 был идентифицирован один образец, содержащий наиболее распространенную в области 12-го экзона данного гена соматическую мутацию N542-E543 del. Определение уровня аллельной нагрузки проводили трижды в динамике развития заболевания с августа 2013 г. по июнь 2015 г. Полученные результаты свидетельствуют о том, что в ходе развития заболевания аллельная нагрузка у пациента возрастает и за 23 мес наблюдения этот показатель вырос более чем в 2 раза, что свидетельствует о соответствующем увеличении количества клеток трансформированного клона. В то же время до настоящего момента у пациента наблюдается клинико-гематологическая компенсация заболевания на фоне проведения умеренных терапевтических воздействий - эксфузионной и дезагрегационной терапии. Предложенная методика позволяет детектировать мутации в анализируемом фрагменте, а также проводить количественный мониторинг аллельной нагрузки в динамике заболевания с целью контроля эффективности используемой терапии. | |
Тема | МУТАЦИИ В 12-М ЭКЗОНЕ ГЕНА JAK2 | |
Тема | МИЕЛОПРОЛИФЕРАТИВНЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ | |
Тема | ИСТИННАЯ ПОЛИЦИТЕМИЯ | |
Тема | ПИРОСЕКВЕНИРОВАНИЕ | |
Тема | EXON 12 JAK2 MUTATIONS | |
Тема | MYELOPROLIFERATIVE DISEASE | |
Тема | POLYCYTHEMIA VERA | |
Тема | PYROSEQUENCING | |
Название | Using of pyrosequencing method for the detection and quantitative determination of mutant JAK2 Exon 12 Allele Burden | |
Тип | Journal Article | |
Тип | Journal Article Preprint | |
Страницы | 196-200 | |
ГРНТИ | 76.29.33 | |
Дата обновления | 2018-02-07T07:26:36Z | |
DOI | 10.18821/0234-5730-2016-61-4-196-200 | |
Институт | Институт фундаментальной биологии и биотехнологии | |
Подразделение | Кафедра медицинской биологии | |
Журнал | Gematologiya i Transfuziologiya | |
Квартиль журнала в Scopus | Q4 | |
Квартиль журнала в Web of Science | Q4 |